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Post by account_disabled on Sept 18, 2023 23:15:02 GMT -8
纯化的含Ψ的长与长的含Ψ混合,最终浓度为–μ。使用填充有纤维素的微量离心机旋转柱纯化μ掺标样品。从流出液中回收的纯化未结合级分和未纯化的输入μ点在斑点印迹上进行分析。使用填充有纤维素的微量离心机旋转柱对指定量的含有Ψ的进行纤维素纯化。使用特异性在斑点印迹上分析与纤维素结合或从流通级分未结合中回收的的等分试样和输入。还在非变性%琼脂糖凝胶中分析了相应样品的等分试样。值得注意 的是,衍生的污染物以及加标的被去除,表明纤维素材料的结合能力高于输入中存在的总量,并且不是本实验中的限制因素。为了确定纯化方案可以去除的最大量,我们评估了越来越多的长与纤维素的结合。在旋转柱中,纤维素几乎结合了所有μΨ含, 电话号码列表而μ明显超过了纤维素的结合能力图。使用含的获得了类似的结果数据未显示。纤维素色谱法去除长度超过的体外转录过程中产生的可能具有不同的长度;因此,我们测试了纤维素色谱去除至之间的能力。将商业梯子与纤维素在含乙醇的层析缓冲液存在下孵育或分钟。 进行选择。小鼠和分别购自和。使用克隆系统将克隆到载体中,并通过测序进行验证。细胞被编码表达载体的慢病毒稳定感染。细胞增殖和活力细胞在第天接种并在第和天收获,或在第天用转染并在第和天收获。添加台盼蓝以测量活力。使用测量细胞增殖和活力。动 物实验将×细胞或衍生物或×细胞或衍生物皮下注射到周龄雄性小 鼠的两侧胁腹中。植入后九天,将小鼠随机分为两组,并在第天第天和第天腹膜内注射μ对照大鼠α或抗克隆参考文献。使用数字卡尺每周测量肿瘤体积两次。个体生长曲线如补充图所示。当肿瘤体积达到时处死小鼠并监测总体生存率。所有实验均按照联邦法律和机构指南进行,并得到丹纳法伯癌症研究所动物护理和使用委员会的批准。抗体使用的抗体请参阅补充表。蛋白质印迹
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